Guanjie Biotech - aommaviy ergotionin kukuniyetkazib beruvchi. Keling, bugun bu haqda gaplashamiz. Ergotionin (EGT) tabiiy antioksidant bo'lib, uni inson tanasining o'zi sintez qila olmaydi. U erkin radikallarni tozalash, detoksifikatsiya, DNK biosintezini ta'minlash, normal hujayra o'sishi, hujayra immuniteti, radiatsiyaga qarshi, oqlash va qarishga qarshi kabi noyob hujayra fiziologik himoya funktsiyalariga ega.Ommaviy ergotionin kukuni(EGT) oziq-ovqat, kosmetika, funktsional oziq-ovqat va biotibbiyot sanoatida keng qo'llash istiqboliga ega. Shu bilan birga, tabiiy antioksidant sifatida u xavfsiz va toksik emas, bu ham uni sanoatning hozirgi rivojlanishida issiq nuqtaga aylantiradi.
Ergotionin kukunini tayyorlash usullari
Tayyorlash usullariommaviy ergotionin kukunitabiiy biologik ekstraksiya, kimyoviy sintez va biosintez [3-4] kiradi. Kimyoviy sintez usulini tayyorlash qiyin va qimmat va xavfsizlik kafolatlanmaydi. Tabiiy bioekstraktsiya usuli past rentabellik va yuqori narxga ega. Ergotioninning qo'llanilishini cheklaydi. Uning biosintez usulining afzalliklari arzonligi va xom ashyoning oson mavjudligi.
● Ergotioninning kristallanishi va kimyoviy formulasi
Sintetik biologiyaning o'sishi bilan ergotioninning hosildorligi metabolik modulyatsiya kabi fermentatsiya vositalari bilan samarali ravishda oshirilishi mumkin. Bu mahsulot xavfsizligini ta'minlaydi va uni qo'llash sohasini kengaytiradiommaviy ergotionin kukuni. Shu sababli, fermentatsiya va transformatsiya qilish uchun tabiiy qutulish mumkin bo'lgan mikorizal qo'ziqorinlardan foydalanish ergotioninni tayyorlashning kelajakdagi rivojlanish yo'nalishiga aylandi.
● Sintetik biologiyaning ergotionin hosildorligiga ta'siri
uchun tabiiy mikorizal qo'ziqorinlarni fermentatsiya texnologiyasini takomillashtirishommaviy ergotionin kukuniishlab chiqarish
Turli xil tabiiy mikorizal zamburug'lar ergotioninni sintez qilish qobiliyatiga ega ekanligi aniqlandi. Bularga enoki qo'ziqorinlari, shiitake qo'ziqorinlari, shiitake qo'ziqorinlari, reishi qo'ziqorinlari, porcini qo'ziqorinlari, Agaricus bisporus qo'ziqorinlari, amigdalus qo'ziqorinlari va oltin ustki qo'ziqorin qo'ziqorinlari kiradi.
Sintezlash jarayonini o'rganishdaommaviy ergotionin kukunimiksomitsetlarning fermentatsiyasi natijasida ergotioninning sintezi va to'planishiga turli xil va turli konsentratsiyali aminokislotalarning ta'siri juda xilma-xil ekanligi aniqlandi. Ular orasida metionin ergotioninning to'planishiga eng aniq ta'sir ko'rsatdi. Keyinchalik sistein va histidin. Ergotionin ishlab chiqarishning fermentatsiya jarayoni shiitake qo'ziqorini miselyumidan asosiy tana sifatida foydalangan holda tekshirildi.
Uglerod manbai 25 g / l fruktoza va 1 g / l aspartik kislota bo'lganda, hosil 1,89 mg / g DW ga yetdi. Muhitga 2 mmol/l metionin qo‘shilganda mitseliyda ergotionin ishlab chiqarish 15 kunlik fermentatsiyadan keyin 1,8 baravar yuqori bo‘ldi. Ergotionin ishlab chiqarish jarayonini o'rganish uchun bodom qo'ziqorini mitseliyasini 10 litr hajmdagi tank shkalasida fermentatsiyalash orqali madaniyat muhitiga 4 mmol / L histidin, 1 mmol / L sistein va 1 mmol / L metionin qo'shildi.
ning mazmuniommaviy ergotionin kukunimitseliyda fermentatsiyaning 18-20kuni taxminan 64,2 mg/l ni tashkil etdi. Ergotionin fermentatsiyasi uchun optimal uglerod va azot manbalari glyukoza va tripton bo'lib, ular o'rta optimallashtirish orqali yanada optimallashtirildi. Ergotionin oltin qoplamali siderofor mitseliysi yordamida chuqur fermentatsiya orqali tayyorlangan. Shu bilan birga, 8 mmol / L sistein, 4 mmol / L histidin va 0, 5 mmol / L metionin qo'shildi va miselyumdagi ergotionin miqdori fermentatsiyaning 16 kunida 97,69 mg / L ga yetdi.
Aminokislotalar, prekursorlar va ekzogen oziqlanish omillarining ergotionin sintezi va to'planishiga ta'siri asosida ergotionin ishlab chiqarish yuqori bo'lgan tekis qo'ziqorin shtammi tekshirildi. Va ergotioninning yuqori intensiv to'planishi uchun chuqur fermentatsiyani nazorat qilish strategiyasi o'rnatildi. Bundan tashqari, mikroorganizmlar tomonidan sintez qilingan ergotioninning ko'p qismi hujayra ichida to'planganligi sababli, uni faqat hujayradan tashqariga ko'chirish orqali aniqlash va ishlatish mumkin. Bir nechta sohalarda ishlab chiqarish xavfsizligi va mahsulot xavfsizligi talablariga javob berish uchun hujayra ichidagi ergotionin uchun umumiy suvli fazali yuvish jarayoni ham o'rnatildi [5].
Ommaviy ergotionin kukunigenetik jihatdan ishlab chiqilmagan tabiiy qutulish mumkin bo'lgan mikorizal qo'ziqorinlarni fermentatsiyalash orqali tayyorlangan. Eng katta afzallik - bu shtamm va mahsulotning oziq-ovqat xavfsizligi. Genomika va transkriptomika bilan solishtirganda, mikobakteriyalar metabolomikasi nisbatan kam o'rganilgan. Shuning uchun fermentatsiya jarayonining metabolomikasini tahlil qilish va optimallashtirish ergotioninning fermentatsiya to'planish darajasini yanada yaxshilaydi va ishlab chiqarish tannarxini kamaytiradi.
● Sintetik biologiya bilan o'zgartirilgan mikroorganizmlar tomonidan ergotioninni tayyorlash
Ergotionin biosintetik yo'li va asosiy ferment tahlilining nazariy yo'l-yo'riqlariga asoslanib, ba'zi model mikroorganizmlarda ergotionin biosintetik fermentlarining geterologik ifodasi amalga oshirildi. Bu ergotionin tomonidan yaratilgan bir qator bakteriyalarni yaratdi va fermentatsiya hosildorligini oshirish uchun optimallashtirildi.ommaviy ergotionin kukuni120-katta.
Asosiy ferment uchun geni E. coli ga klonlandi va ishlab chiqilgan bakteriyalar fermentatorda partiyani to'ldirish madaniyatiga qo'llanildi. Fermentatsiya muhitini optimallashtirish orqali 216 soatlik fermentatsiyadan so'ng ergotioninning rentabelligi 657 mg / L ga yetdi, bu asosiy ferment va uning tegishli regulyatsiyasi ergotioninning samarali sinteziga ta'sir qilishi mumkinligini ko'rsatadi.
Asosiy fermentlarni tartibga solishdan tashqari, prekursor aminosinning sintez yo'lini o'zgartirish va optimallashtirish ham ergotioninning sintez samaradorligini oshirishning samarali usuli hisoblanadi. Escherichia coli-da ergotionin sintezi yo'llarining ikki xil manbalari heterologik tarzda ifodalangan, bu ergotionin ishlab chiqarishni yaxshilashi mumkin. Ushbu modifikatsiya strategiyasiga ko'ra, to'ldirish partiyasi fermentatsiyasi uchun 3 litrli tank yordamida ergotioninning to'planishi 108 soat davomida 710,53 mg / L ga etdi.
Shu bilan bir qatorda, E. coli da sistein sintezi va sekretsiya tizimini faollashtirish orqali yuqori sistein ishlab chiqaruvchi shtamm olingan. Sintez kaliti fermenti geni ushbu shtammga klonlandi va metionin sinteziga ta'sir qiluvchi gen nokaut qilindi. Histidin, metionin va Na2S2O3 kabi qo'shimchalar bilan 3 litrli fermentatorda fermentatsiya qilish uchun o'zgartirilgan shtammdan foydalangan holda, hosilommaviy ergotionin kukuni216 soat davomida 1,3 g/L ga yetdi. Bu ergotioninni ishlab chiqarilgan qo'ziqorin fermentatsiyasi orqali eng yuqori fermentatsiya darajasidir.
● Sintetik biologiya o'zgartirilgan qo'ziqorinlar tomonidan ergotioninni tayyorlash
Zamburug'li ergotioninning sintezi ikkita asosiy fermentni o'z ichiga oladi. Bu sintetik yo'lning metabolik regulyatsiyasini sezilarli darajada soddalashtirishi mumkin. Kelajakda u ergotioninning geterologik sintezining asosiy yo'nalishiga aylanishi mumkin. Pulsatilla vulgarisning ergotionin sintezi geni Aspergillus oryzae da heterologik tarzda ifodalangan. Ergotionin ushbu ishlab chiqilgan bakteriya yordamida qattiq holatdagi fermentatsiya orqali tayyorlangan va hosilommaviy ergotionin kukunifermentatsiyadan keyin optimallashtirish 231 mg / kg ni tashkil etdi. Oldingi fermentatsiyaga nisbatan ergotionin sintezi darajasining 20- barobar ortishiga erishildi.
Tabiiy mikobakteriyalar tomonidan ishlab chiqarilgan ergotioninning eng yuqori fermentatsiya darajasi 500 mg / l dan oshdi. Fermentatsiya davri odatda 10-20 kun edi. Ishlab chiqarilgan bakteriyaning fermentatsiya davri 3-9 d gacha nazorat qilinishi mumkin edi. Eng yuqori fermentatsiya darajasi 1,3 g / l edi. Biroq, mahsulotni tozalash va ishlatish kerak.
Kelajakda biz ergotionin sintezining xarakterli elementlarini yanada o'rganamiz va optimallashtiramiz va yuqori ergotionin ishlab chiqarish uchun shtammning genetik mexanizmini tahlil qilamiz.
Bir tomondan, biz fermentatsiya jarayonini optimallashtirish bo'yicha nazariy ko'rsatmalar beramizommaviy ergotionin kukuni. Boshqa tomondan, ergotionin sintezi komponentlarining shassi hujayralari bilan mosligini optimallashtirish uchun sintetik biologiya texnologiyasi yordamida shassi hujayralarini yaxshilaymiz. Metabolik tarmoq modeli bilan birgalikda biz asosiy fermentlarning ifodasini optimallashtirishimiz va ergotionin sintezi uchun hujayra zavodini yanada samarali qurishimiz mumkin.
Guanjie Biotech ishlab chiqaradiommaviy ergotionin kukuni, qaysi oq kukun hisoblanadi. Mahsulotlarimiz HPLC usulidan foydalanadi. Biz laboratoriyamiz tomonidan sinovdan o'tkazishimiz yoki uchinchi tomon testini taqdim etishimiz mumkin. Bizni so'rashga xush kelibsiz:info@gybiotech.com.
Referentsiya
[1], língíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíng. yàngjín, 2019, 40(23): 334-340.DOI:10.7506/spkx1002-6630-20181016-158
[2], Borodina I, Kenny LC, McCarthy CM va boshqalar. Ergotionin biologiyasi, antioksidant ozuqaviy vosita. Nutr Res Rev, 2020, 33(2): 190-217. DOI: 10.1017/S0954422419000301
[3], Xu JZ, Yadan JC. l-(+)-ergotioninning sintezi. J Org Chem, 1995, 60(20): 6296-6301. DOI: 10.1021/jo00125a014
[4],麦角硫因的合成与降解代谢. 日然产物研究与开发, 2015, 27(6): 1112-1117, 1002.
[5], Chjan V, Liu Q, Chjou T va boshqalar. Pleurotus ostreatus mitseliyasidan ergotioninning suvli ekstraktsiyasi va suv ostida fermentatsiya paytida ergotioninning to'planishining muntazamligi. Tadqiqotlar va sharhlar: Mikrobiologiya va biotexnologiya jurnali, 2016, 5(1): 1-8.
